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談一下怎樣靈敏使用ELISA這個(gè)檢查辦法以及怎樣去選擇ELISA試劑盒。ELISA這個(gè)辦法的原理，我們都很明白。
可真實(shí)用起來(lái)的時(shí)分，有時(shí)分就有點(diǎn)犯模糊，我談一下自個(gè)的了解。
1、有些客戶會(huì)用OVA(卵清蛋白)做一些哮喘，過(guò)敏性腸炎的模型，后來(lái)會(huì)檢查粘膜特異性的sIgA以及血清里邊IgG，IgE等目標(biāo)。當(dāng)客戶向我咨詢采購(gòu)這幾個(gè)目標(biāo)的盒子的時(shí)分，我很肯定地說(shuō)這些目標(biāo)的檢查要你自個(gè)特制，不會(huì)有商品化的盒子出售的。
2、ELISA試劑盒對(duì)于一些小分子的檢查，比方前列腺素、糖皮質(zhì)激素的檢查，我的了解是要用競(jìng)爭(zhēng)法ELISA去檢查，也要采購(gòu)采用這個(gè)辦法的盒子。通常細(xì)胞因子的檢查，都是采用常規(guī)的夾心法ELISA檢查，由于因子分子量比較大，通常10幾個(gè)KD擺布，很簡(jiǎn)單找到兩個(gè)或許多個(gè)抗原表位。而小分子很難找到兩個(gè)不一樣的表位，也就決定了包被抗體和檢查抗體無(wú)法一起小分子并固相化。解決方案就是酶標(biāo)板上包被二抗，每個(gè)孔參加一定量的酶標(biāo)的小分子，然后加樣品，再加不帶符號(hào)的檢查抗體，顯色底物。樣品的意圖小分子的含量越高，吸光度越低。
3、對(duì)于胰島素的檢查，我仍是引薦millpore 旗下LInco公司的檢查試劑盒，不管是放免仍是ELISA，聽說(shuō)權(quán)在他們手中。
4、做試驗(yàn)面向的ELISA試劑盒種屬主要是人，大鼠和小鼠，如今市面上雞、牛、馬、羊、兔各種目標(biāo)的盒子都有售，真不知道這些抗體是怎樣來(lái)的，。據(jù)我所了解，這些炎癥目標(biāo)仍是有很大種屬特異性的。
5、很多客戶有個(gè)誤區(qū)，ELISA試劑盒拿來(lái)一個(gè)目標(biāo)就想當(dāng)然地嘗試用ELISA去檢查，其實(shí)應(yīng)當(dāng)多動(dòng)腦，該檢查活性的檢查活性。